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不規(guī)則抗體篩檢卡標(biāo)準(zhǔn)操作程序
Time：2019-04-16　發(fā)布：xinglongsw888fa 　瀏覽：1600次

一、?準(zhǔn)備工作

（一）微柱凝膠試劑卡的準(zhǔn)備：觀察外觀，如有干膠、雜質(zhì)、氣泡不可使用，之后將卡放置室溫（18－25℃）平衡，再用專用離心機離心5分鐘。

（二）檢測標(biāo)本的準(zhǔn)備：

?1．紅細(xì)胞懸液的制備：將篩檢紅細(xì)胞或譜細(xì)胞配成0.8%濃度的懸液。

?2．血清標(biāo)本的制備：采集被檢對象靜脈血，放入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中，10分鐘后離心，取上清；或者靜脈血采入無抗凝劑試管中，4℃放置?12小時，或37℃放置2小時后離心，2000r/min,10分鐘，取上清（該上清不得有絮狀物或沉淀）。

二、操作步驟

1.?將準(zhǔn)備好的不規(guī)則抗體篩檢卡做好標(biāo)記；

2.?將配好的篩檢細(xì)胞或譜細(xì)胞懸液加入標(biāo)好的微管中，各一滴（或50μl）；

3.?分別立即加入被檢者血清1滴（或50μl）；

4.?加樣后的試劑卡，置37℃孵育器中孵育15分鐘；

5.?使用專用離心機離心5分鐘（900rpm2分鐘，1500?rpm3分鐘），取出肉眼觀察結(jié)果。

結(jié)果判定：根據(jù)所提供的篩檢紅細(xì)胞或譜細(xì)胞的反應(yīng)格局來判定結(jié)果

例：按Ⅰ(-)、Ⅱ(4+)、Ⅲ(-）的實驗結(jié)果及提供如下的篩檢紅細(xì)胞反應(yīng)格局來分析

篩檢細(xì)胞反應(yīng)格局?

編號

Rh-hr

Kidd

MNS

Duffy

Diego

Kell

Lewis

P

D

C

E

c

e

Jka

Jkb

M

N

S

s

Fya

Fyb

Dia

K

k

Lea

Leb

p1

I

+

+

-

-

+

+

+

+

-

-

+

+

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+

+

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+

II

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III

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陰性結(jié)果用排除法,陽性結(jié)果用可能包含法。

以前五種抗原為例：

Ⅰ(-)：?可排除D、C、e；

Ⅱ(4+)：判斷可能含有D、E、c；

Ⅲ(-）：?可排除D、C、c、e；

綜上，可認(rèn)為：此樣品血清中可能含有-E

三、?注意事項

1．應(yīng)用直接抗人球蛋白微柱凝膠免疫試驗檢測病人紅細(xì)胞時，一定要用適量EDTA的試管采血液標(biāo)本，該標(biāo)本不能放入4℃-10℃冰箱保存，以避免紅細(xì)胞在病人體外致敏所致假陽性反應(yīng)。

2．紅細(xì)胞標(biāo)本一定不能被細(xì)菌污染，否則出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。盡可能應(yīng)用當(dāng)日采集的新鮮血做本試驗。如不得不用過夜血或陳舊血，則必須首先用該標(biāo)本做陰性對照試驗，以確定該標(biāo)本是否可以做本實驗。

3．血清標(biāo)本：血清標(biāo)本必須充分去纖維蛋白，否則標(biāo)本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出，阻礙陰性紅細(xì)胞沉淀，呈假陽性反應(yīng)。

4．如在微柱凝膠管中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，強烈提示為紅細(xì)胞抗原抗體陽性反應(yīng)，也不排除其他原因所致溶血，故對此標(biāo)本一定認(rèn)真分析，并向上級主管技術(shù)人員報告并討論其原因。

5．每日試驗前，先取出微柱凝膠卡放置至室溫。

6．試劑卡應(yīng)放在18-25℃儲存，如若長期放在4℃冰箱，建議每1-2個月取出，用專用離心機離心一次，以防止干膠或產(chǎn)生氣泡。

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